豬尿中14種β-受體激動劑殘留的測定

來源：SCIEX

此方法所需樣品由阿爾塔科技提供：

注：可以按照客戶需求，定制特定品種、特定濃度、特定溶劑的混標(biāo)。

將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因為考慮對人體會產(chǎn)生副作用，各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。瘦肉精是一類藥物，而不是一種特定的物質(zhì)，是指能夠促進(jìn)瘦肉生長的飼料添加劑。任何能夠促進(jìn)瘦肉生長、抑制肥肉生長的物質(zhì)都可以叫做“瘦肉精”。目前，能夠?qū)崿F(xiàn)這種功能的物質(zhì)是一類叫做β-受體激動劑的藥物，比如在中國造成中毒的克侖特羅（clenbuterol）和美國允許使用的萊克多巴胺/又譯雷托巴胺（Ractopamine）。

瘦肉精在上海曾經(jīng)引發(fā)了幾百人的中毒事件。而在臺灣，由于從美國進(jìn)口的豬肉里含有健康的肉瘦肉精，幾乎挑起一場政治爭端。由于西方國家一般不消費動物內(nèi)臟（豬肉一般不含瘦肉精，但內(nèi)臟特別是肝臟則會殘留瘦肉精），因而在美國、加拿大、新西蘭等國，瘦肉精這類物質(zhì)的使用是合法的。.

引言

β-受體激動劑主要用于治療人、畜支氣管哮喘和支氣管痙攣。在用于畜牧飼喂時被非法用于促進(jìn)動物生長，減少脂肪沉積，提高瘦肉率的作用。人類長期食用含β-受體激動劑殘留的食物可能會引起中毒，并對健康造成極大的傷害。目前，我國禁止在使用動物的飼養(yǎng)中使用。由農(nóng)業(yè)部發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)《豬尿中β-受體激動劑多殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（農(nóng)業(yè)部1025號公告-11-2008）》和農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《動物尿液中11中β-受體激動劑的檢測（農(nóng)業(yè)部1063號公告-3-2008）》，對動物尿液中β-受體激動劑液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法進(jìn)行了規(guī)定。

本實驗依據(jù)農(nóng)業(yè)部1025號公告-11-2008和農(nóng)業(yè)部1063號公告-3-2008中的前處理方法，使用液相色譜質(zhì)譜外標(biāo)法定量，并進(jìn)行簡單的可行性驗證。

樣品前處理

準(zhǔn)確量取5 mL尿樣與50 mL離心管內(nèi)，加入0.5 mL2 mol/L的乙酸銨緩沖液(pH=5.2），加入40 μL葡萄糖醛苷酶和芳基硫酸酯酶，漩渦混勻，37℃避光水浴震蕩16 h。10000 rpm離心10 min，取上清液與另一50 mL離心管內(nèi)，用5 mol/LNaOH 調(diào)節(jié)pH值9.8，加入10 mL異丙醇-乙酸乙酯，加入約2 g固體氯化鈉，漩渦震蕩10 min，5000 rpm離心10 min。以10 mL異丙醇-乙酸乙酯再次提取，合并兩次上清液，50℃旋轉(zhuǎn)蒸干，以5 mL 2mol/L乙酸銨溶液溶解，備用。

取備用液過MCX柱以5 mL 5%氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液在50℃下氮氣吹干。用1 mL0.2%甲酸水溶液溶解，待測，過0.22 μm濾膜過濾，待測。

液相色譜條件

流動相

A：含5 mM甲酸銨和0.1%甲酸水溶液

B：乙腈

色譜柱

Phenomenex KinetexC18 4.6×100mm 2.6 μm 或相當(dāng)

柱溫

40℃

梯度時間表

質(zhì)譜條件

TripleQuad? 6500

新型的IonDrive?專利技術(shù)貫穿多組件，以及新設(shè)計的高能檢測器HED+，提供超寬的定量線性動態(tài)范圍，無可比擬的定量分析靈敏度，無與倫比的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性?？膳c離子淌度差分技術(shù)SelexION?匹配，提高選擇性。

離子源：具備電噴霧接口的Turbo V?離子源

極性：正離子模式，離子源相關(guān)參數(shù)如下：

CUR:35.00

TEM:700.00

GS1:60.00

GS2:55.00

IS:5500.00

化合物離子對信息

總結(jié)

本方法基于國家標(biāo)準(zhǔn)《豬尿中β-受體激動劑多殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（農(nóng)業(yè)部1025號公告-11-2008）》和農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《動物尿液中11中β-受體激動劑的檢測（農(nóng)業(yè)部1063號公告-3-2008）》，使用LC-MS/MS法測定動物源食品中多種β-受體激動劑殘留的測定。經(jīng)驗證，適用于SCIEX Triple Quad? 3500, 3200, 4000系列， 4500系列、API 5000、5500系列以及6500系列的LC-MS/MS系統(tǒng)。方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，適用于日常分析。

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